诊断依据：

　　1.病史 有非婚性接触史或配偶有感染史。

　　2.临床表现 典型的临床表现为生殖器部位痛性溃疡，合并腹股沟淋巴结化脓性病变。

　　3.实验室检查

　　(1)涂片见革兰阴性短杆菌、排成鱼群状。

　　(2)培养见典型菌落，符合生化鉴定。

　　(3)暗视野显微镜检查梅毒螺旋体阴性和梅毒血清学试验阴性。

　　符合上述要点且经培养证实者为确诊病例，如缺少培养证据则为临床疑似病例。

　　实验室检查：

　　1．涂片染色检查 可从溃疡边缘深部或基底部取材，先用生理盐水洗净患部，取其渗出物。如为淋巴结穿刺取材，应从健康皮肤处进针，以免形成瘘管。涂片时应从玻片的一端推向另一端，以保持细菌的特征形态。涂片固定后可用Gram、Wright、Giemsa 或Pappenheim Saathof 染色。约50%可查见长约1～2cm末端钝圆的二极染色的短小杆菌，Gram 染色阴性，单个或沿黏液丝方向呈团状或平行排列小群聚集。溃疡处常有与Ducrey 嗜血杆菌相似的短小杆菌污染，但污染菌无“鱼群样”特征。

　　2.病原菌培养 可从横痃或溃疡损害处取材。常用培养基为淋球菌胎牛血清培养基、Mueller-Hinton 巧克力培养基等。2h内接种，置于5%～10%二氧化碳和饱和湿度环境中，于33～34℃至少培养48h。Ducrey 嗜血杆菌的菌落直径为2mm，呈光滑的半球形，黏性极强。

　　3.鉴定试验 对已分离出的Ducrey 杆菌，应进行生化试验进行鉴定，有氧化酶试验和硝酸盐还原试验等。

　　4.免疫学检查 间接免疫荧光试验以与Ducrey 杆菌外膜成分起反应的单克隆抗体检测生殖器溃疡分泌物涂片。酶免疫试验在培养阳性的本病患者中检出率为93%，可用于大规模人群的筛选检查。

　　5.分子生物学检查 有核酸杂交技术和核酸扩增技术等，后者又分为PCR 和LCR。32P 标记的DNA 探针已用于鉴定培养中的Ducrey 杆菌。用PCR 技术检测生殖器溃疡中的Ducrey 杆菌对本病的诊断有一定价值，但也存在不少问题。

　　其他辅助检查：组织病理检查：

　　1.皮肤溃疡 显示3 个层带，典型者有诊断意义。

　　(1)浅层：即基底，较狭窄，由中性粒细胞、红细胞、纤维蛋白和坏死组织组成。用Giemsa 或Gram 染色可检出Ducrey 嗜血杆菌。

　　(2)中层：较宽，有多数新生血管形成，血管内皮细胞显着增生，可导致血管腔闭塞，有血栓形成和继发性坏死。浅层和中层间可见有水肿。

　　(3)深层：主要为成纤维细胞增生，淋巴细胞和浆细胞密集浸润。

　　2.受累淋巴结 呈重度急性炎症反应，有中性粒细胞浸润及坏死。